3T3-L1小鼠脂肪細胞作為一種常用的脂肪細胞模型，在肥胖研究、代謝相關疾病探索以及藥物篩選等諸多領域有著至關重要的作用。其提取方法主要包含以下幾個關鍵步驟：
首先，細胞復蘇環(huán)節(jié)不容忽視。從液氮中取出凍存的3T3-L1小鼠前脂肪細胞株，需迅速將其置于37℃水浴鍋中，輕柔晃動使其快速解凍，這一過程中要確保凍存管的密封性，防止水浴中的水進入管內(nèi)污染細胞，待細胞懸液全融化后，用酒精棉球擦拭凍存管外壁進行消毒，隨后將細胞轉(zhuǎn)移至離心管中，加入適量的培養(yǎng)基進行離心，去除凍存液中的二甲基亞砜等成分對細胞的潛在損害，離心后棄上清，獲得相對純凈的細胞沉淀，再將其重懸于新鮮的培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶內(nèi)進行初步培養(yǎng)。
接著，便是細胞的常規(guī)培養(yǎng)與誘導分化過程。將復蘇后的3T3-L1細胞放置于含有合適血清（如胎牛血清）、葡萄糖以及抗生素的DMEM培養(yǎng)基中，在37℃、5%二氧化碳的細胞培養(yǎng)箱里進行培養(yǎng)。待細胞生長至匯合度達到一定程度（通常約100%）時，便開始進行誘導分化操作。通過更換特定的誘導培養(yǎng)基，一般包含胰島素以及IBMX等成分，持續(xù)作用數(shù)天，促使前脂肪細胞向成熟脂肪細胞轉(zhuǎn)化。在這個過程中，要密切觀察細胞的形態(tài)變化，原本呈成纖維細胞樣的前脂肪細胞會逐漸變圓，胞漿內(nèi)開始出現(xiàn)脂滴，這是脂肪細胞分化的典型特征。
最后，當細胞完成分化后，若需要獲取較為純凈的脂肪細胞用于后續(xù)實驗，可采用消化結合離心的方法進一步純化。先用適量的消化液處理分化后的細胞，使細胞間的連接蛋白被分解，細胞相互分離，形成單個細胞懸液，然后加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，再次離心，經(jīng)過多次清洗和離心后，就能得到純度較高的
3T3-L1小鼠脂肪細胞，可用于后續(xù)的脂肪代謝相關指標檢測、基因表達分析以及藥物作用效果評估等實驗研究，為深入探索脂肪細胞相關的生理和病理機制提供可靠的細胞模型基礎。
